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混合型生物洗油菌發酵上清液的表面張力值測定(三)
來源:東北石油大學三亞海洋油氣研究院 黑龍江省科學院微生物研究所 瀏覽 887 次 發布時間:2025-01-03
實施例2
表面張力測試:采用白金板測定菌株發酵上清液的表面張力。
將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1數量比混合)分別接種于LB液體培養基中,在28~30℃條件下振蕩培養發酵,直至發酵液中菌落濃度達到108~109
cfu/mL。
分別取上述各組30 mL發酵菌液,10000×g室溫離心10 min,取各組發酵上清液,利用表面張力儀測定各組發酵液的表面張力,測定3次,取平均值,測試結果如表1所示。
表面張力是洗油劑對原油洗脫能力的重要指標,數值越低、洗脫能力越強。測試結果顯示解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8發酵上清液均能降低表面張力,混合菌劑發酵上清液的表面張力值更低。
實施例3
界面張力測試:在45℃下,采用TX500C界面張力儀測定菌株發酵上清液與原油間的界面張力。
將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1數量比混合)分別接種于LB液體培養基中,在28~30℃條件下振蕩培養發酵,直至發酵液中菌落濃度達到108~109cfu/mL。
分別取上述各組30 mL發酵菌液,10000×g室溫離心10 min,取各組發酵上清液,在45℃下,用TX500C界面張力儀進行測定,另取同體積的LB液體培養基作為空白組。當連續3次讀數之差在10-3m N/m之內時,即可認為測定的體系已經達到平衡狀態,記錄最終的界面張力,測試結果如表2所示。
從表2實驗結果中可以看出與空白相比解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8的界面活性好,油水界面低至1.92 mN/m和1.90mN/m,為低界面張力水平。混合菌劑的界面活性更為突出,低至0.68mN/m。
實施例4
洗油實驗:
將原油與石英砂按照質量比為1∶5攪拌均勻制備油砂,放入60℃烘箱中老化24 h,取出密封備用。
將解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8、混合菌劑(2組,解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens
)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8按1:1和3:2數量比混合)分別接種于LB液體培養基中,在28~30℃條件下振蕩培養發酵,直至發酵液中菌落濃度達到108~109cfu/mL。
分別將上述各組30 mL發酵液倒入不同的離心管中,另取同體積30 mLLB液體培養基作為空白組;然后各離心管分別放入上述經過老化的15g的油砂(初始油砂含油量為2.5g),密封,均勻震蕩5次后,放入60℃烘箱靜置,24 h后取出。傾倒盡上層液體后,用20~25℃蒸餾水反復沖洗至水相無色,并收集合并沖洗液。
再將油砂烘干進行稱量(離心管+油砂),質量為m1,離心管的質量為m0。
洗油效率η通過如下公式進行計算:
η=(15-(m1-m0))/2.5
各組洗油效率測試結果如表3所示,解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)ZZ-11和膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8發酵液均具有優秀的洗油效率,本發明混合菌劑的洗油效率更為優異,分別達到84.39%和93.32。
綜合實施例1~4的測試結果說明解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZZ-11、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)ZZ-8均可作為生物洗油菌;本發明混合菌劑能將油從油砂表面分離開來,洗油后油砂潔凈、松散,有防止原油再粘附的作用,具有十分優異的洗油效果。





